接种密度和光照对脱毒马铃薯试管薯诱导的影响论文

接种密度和光照对脱毒马铃薯试管薯诱导的影响论文

　　马铃薯是以无性繁殖材料为基础的作物，在生产中很容易被病毒感染，使正常生理机能受到干扰和破坏，造成产量下降，品质退化[1]。脱毒试管薯是继脱毒试管苗之后发展起来的一种保存种质资源的材料，具有种性高、繁殖快、体积小，易储藏、生产不受季节限制以及可常年繁殖等优点[2]，不仅能用来生产脱毒微型薯，缓解春夏季节试管苗的生产压力，还可以最大限度利用组培室现有资源，实现周年化运转，降低生产成本。

　　1 材料与方法

　　选用甘肃农垦条山集团主栽品种“大西洋”为供试材料。

　　1.1 不同接种密度对试管薯结薯率的影响 将培养后的基础苗壮苗在无菌条件下切成单芽茎段，接种到装有60 mL的A(MS+5 mg/L B9+8%糖)、B(MS+8%糖)、C(MS+2%活性炭+8%糖)3种培养基上，每瓶接种5段、10段、15段，放入培养室培养4周后转入光照培养箱，进行试管薯诱导，温度22±2 ℃，光照强度1 000 LX，光照8 h/a诱导结薯，3个月后收获试管薯。

　　1.2 不同光照强度对试管薯结薯率的影响 将培养后的基础苗壮苗在无菌条件下切成单芽茎段，接种到装有60 mL的A(MS+5 mg/L B9+8%糖)、B(MS+8%糖)、C(MS+2%活性炭+8%糖)3种培养基上，每瓶接种10段，共接种10瓶，放入培养室培养4周后转入光照培养箱，进行试管薯诱导，温度22±2 ℃;光照强度：全黑暗条件、1 000 LX、3 000 LX，光照8 h/a诱导结薯，3个月后收获试管薯。

　　2 实验数据的收集与整理

　　培养3个月后收获试管薯，用纱布吸干水分，统计试管薯的结薯数量(个)、大薯数(个)2项指标。试管薯直径≥2 mm为结薯，5 mm以上为大薯，取10瓶平均值进行分析。

　　3 结果与分析

　　3.1 不同接种密度对试管薯诱导结薯的影响 从表1中可以看出，在相同培养基上，接种密度为15株/瓶试管薯的结薯数和大薯数显著高于接种密度10株/瓶和5株/瓶的结薯数和大薯数。也可以得出，并非接种密度越小，单株营养越充沛结薯数和大薯数越多，而是在一定的群体效应下其结薯数和大薯数最多，而随着接种密度的增加，结薯数虽有所增加，但是大薯率会有所下降。

　　表1 不同接种密度对试管薯诱导结薯的影响

　　培养基接种密度(株)结薯数(个)大薯数(个)

　　MS+5 mg/L B9+8%糖510

　　10245

　　153518

　　MS+8%糖53414

　　104320

　　155022

　　MS+2%活性炭+8%糖511

　　1042

　　15169

　　3.2 不同的光照强度对试管薯结薯率的影响 对表2数据分析得出，在3种不同的培养基上，光照强度3 000 LX条件下结薯数、大薯数均高于其他2组，可见3 000 LX的光强更有利于试管薯的形成和膨大;黑暗条件虽有利于试管薯的形成，但不利于进一步膨大。因此，从提高结薯数量和大薯率方面考虑，光强3 000 LX、培养基MS+5 mg/L B9+8%糖的组合更适合于大西洋脱毒试管薯的诱导。

　　表2 不同的光照强度对试管薯结薯率的影响

　　培养基光照强度(LX)结薯数(个)大薯数(个)

　　MS+5 mg/L B9+8%糖全黑暗13711

　　1000245

　　300018589

　　MS+8%糖全黑暗1380

　　10004320

　　300019730

　　MS+2%活性炭+8%糖全黑暗680

　　100042

　　3000829

　　4 小结与讨论

　　本试验从影响诱导大西洋脱毒试管薯的接种密度和光照强度进行了研究，并对生产环节进行了改进。在试验中发现，糖浓度作为试管苗生长和试管薯诱导的重要因子，它的作用不可替代[3]，8%的糖浓度不但有利于试管薯的`形成，也有利于壮苗。

　　接种密度[4]对试管薯结薯数量和大薯率具有一定影响。15株/瓶的接种密度更经济、更适合于大西洋脱毒试管薯的诱导。

　　在光照强度为3 000 LX、温度22±2 ℃，每天光照8 h的培养条件下，MS+5 mg/L B9+8%糖的培养基诱导结薯数和大薯数最多，可见在离体条件下，适当的光照强度对试管薯薯块形成和膨大具有促进作用。这一结果与部分学者认为在黑暗条件下更有利于试管薯的形成和膨大[5]有差异。主要原因是，黑暗处理时间过长，易导致试管苗黄化、枯死，不利于试管薯的进一步膨大。

　　本试验在前人的研究基础上进行了改进，即采用直接诱导法：将基础苗直接接种到含8%糖浓度的试管薯诱导培养基上，进行试管薯的诱导。这种操作模式，不仅减少了操作环节，降低了污染，更适用于工厂化生产脱毒试管薯。